普通基因擴(kuò)增和PCR的區(qū)別
發(fā)布時(shí)間：2013-12-19 閱讀：715次
PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的英文縮寫，它是一種基因擴(kuò)增技術(shù)，應(yīng)用這個(gè)技術(shù)的儀器叫PCR儀，或者叫基因擴(kuò)增儀。普通PCR儀是定性的，熒光定量pcr儀可以定量。通常說(shuō)基因擴(kuò)增儀是指普通PCR儀。
PCR需要注意以下事項(xiàng)：
1.模板盡量避免含有酶抑制劑！
2.引物保存時(shí)間不易過(guò)長(zhǎng)，要符合引物涉及的原則，在用軟件設(shè)計(jì)結(jié)束后要進(jìn)行適當(dāng)?shù)娜斯ぬ幚怼Ｒ餄舛纫线m，太高容易引起錯(cuò)配及非特異性產(chǎn)物的形成。
3.循環(huán)參數(shù)一般退火溫度應(yīng)低于Tm值5℃。先循環(huán)數(shù)次，然后延伸幾分鐘，再進(jìn)行循環(huán)，有時(shí)候可以加大產(chǎn)物的量。
4.酶濃度過(guò)高容易導(dǎo)致非特異性產(chǎn)物的形成。
5.離子濃度過(guò)高容易導(dǎo)致非特異性產(chǎn)物的增加。
6.dNTP濃度過(guò)高會(huì)抑制酶的活性。
