熒光定量pcr儀的選購要領
發(fā)布時間：2017-09-14 閱讀：1021次
要想購到適合的儀器，先要清楚儀器的各個組合部分。熒光定量pcr儀主要由溫控模塊、檢測器、光路傳導、光源組成。
一、溫控模塊/Peltier：
普通的Peltier加熱方式具有明顯邊緣效應，均一性差，是上一代的模塊PCR加熱技術，正處于被淘汰的邊緣。
目前的溫控模塊：銀，在金屬中銀的導熱性能較高，升降溫速度快，孔間溫度均一性好，邊緣效應相應減少金屬的熱傳導系數(shù)表： 銀 429 ＞銅 401 ＞ 金 317 ＞鋁 237 ＞鐵 80 ＞錫 67 ＞ 鉛 34.8
另：單一模塊升降溫速度高并不代表樣本升降溫速度也高，因此在溫控模塊升降溫速度對比中，終是要看樣本的升降溫速度是否快大升降溫速度不等與平均升降溫速度。
二、檢測器：
熒光定量pcr儀靈敏度：冷CCD ＞CCD ＞光電倍增管 CPM ＞光電二管
CCD作為熒光信號的接受器，其質(zhì)量直接決定了儀器的檢測靈敏度和穩(wěn)定性。
10℃的冷CCD，和常溫CCD有著質(zhì)的區(qū)別，在專業(yè)光學領域，冷CCD的造價成本至少要比常規(guī)CCD高出一倍以上。冷CCD在低的溫度下進行光信號捕捉，能夠提供高的光感靈敏度和低背景噪音。因此，有的熒光定量PCR能夠穩(wěn)定區(qū)分1000和2000拷貝的濃度差異，而有的只能做到區(qū)分5000和10000個拷貝數(shù)。
三、光路傳導：
光路的傳導 光路設計應盡可能有效消除邊緣效應，光路設計是否有效消除邊緣效應，只有實驗才能檢驗。檢驗方法：96/384孔板中及四角各布置標準品，看差異。其中
a、光源直接照射微孔板上：邊緣效應明顯
b、逐孔移動式采光：無邊緣效應，但需時常校正
c、散射采光：邊緣效應較明顯，切換光源時需要光源組件移動
四、光源：
熒光定量pcr儀光強比較：髙強度白光LED ＞ 鹵鎢燈 ＞單色LED
白光LED的亮度約是鹵鎢燈的3倍左右，單色LED的10倍左右，能夠捕捉到多的熒光信號，是專業(yè)光源領域的新技術代表，2011年開始普遍應用于專業(yè)儀器，無論光強、靈敏度與均一性可與上一代氙燈光源媲美，且壽命提升了10倍以上。鎢燈燈絲本身存在閃爍不穩(wěn)定的問題，其激發(fā)能量遠低于白光LED，事實上，無需高端品牌汽車的旗艦概念車，如豐田雷克薩斯，已經(jīng)開始使用白光LED作為車頭燈。
壽命比較：髙強度白光LED = 單色LED ＞鹵鎢燈
白光LED的壽命長達10000小時以上，一般可以使用5-10年左右，基本上超過了一般科研儀器的正常工作壽命，基本終身無需換光源，而鹵鎢燈光源基本每2年就要換一次，費時費力，南方是不足一年就要換一次。另：鹵鎢燈每次運行需要半小時預熱，其中累計散發(fā)的熱量對熒光具有明顯的淬滅作用。
上述，便是熒光定量pcr儀的選購要領，供大家借鑒參考，希望對大家有所幫助。
一、溫控模塊/Peltier：
普通的Peltier加熱方式具有明顯邊緣效應，均一性差，是上一代的模塊PCR加熱技術，正處于被淘汰的邊緣。
目前的溫控模塊：銀，在金屬中銀的導熱性能較高，升降溫速度快，孔間溫度均一性好，邊緣效應相應減少金屬的熱傳導系數(shù)表： 銀 429 ＞銅 401 ＞ 金 317 ＞鋁 237 ＞鐵 80 ＞錫 67 ＞ 鉛 34.8
另：單一模塊升降溫速度高并不代表樣本升降溫速度也高，因此在溫控模塊升降溫速度對比中，終是要看樣本的升降溫速度是否快大升降溫速度不等與平均升降溫速度。
二、檢測器：
熒光定量pcr儀靈敏度：冷CCD ＞CCD ＞光電倍增管 CPM ＞光電二管
CCD作為熒光信號的接受器，其質(zhì)量直接決定了儀器的檢測靈敏度和穩(wěn)定性。
10℃的冷CCD，和常溫CCD有著質(zhì)的區(qū)別，在專業(yè)光學領域，冷CCD的造價成本至少要比常規(guī)CCD高出一倍以上。冷CCD在低的溫度下進行光信號捕捉，能夠提供高的光感靈敏度和低背景噪音。因此，有的熒光定量PCR能夠穩(wěn)定區(qū)分1000和2000拷貝的濃度差異，而有的只能做到區(qū)分5000和10000個拷貝數(shù)。
三、光路傳導：
光路的傳導 光路設計應盡可能有效消除邊緣效應，光路設計是否有效消除邊緣效應，只有實驗才能檢驗。檢驗方法：96/384孔板中及四角各布置標準品，看差異。其中
a、光源直接照射微孔板上：邊緣效應明顯
b、逐孔移動式采光：無邊緣效應，但需時常校正
c、散射采光：邊緣效應較明顯，切換光源時需要光源組件移動
四、光源：
熒光定量pcr儀光強比較：髙強度白光LED ＞ 鹵鎢燈 ＞單色LED
白光LED的亮度約是鹵鎢燈的3倍左右，單色LED的10倍左右，能夠捕捉到多的熒光信號，是專業(yè)光源領域的新技術代表，2011年開始普遍應用于專業(yè)儀器，無論光強、靈敏度與均一性可與上一代氙燈光源媲美，且壽命提升了10倍以上。鎢燈燈絲本身存在閃爍不穩(wěn)定的問題，其激發(fā)能量遠低于白光LED，事實上，無需高端品牌汽車的旗艦概念車，如豐田雷克薩斯，已經(jīng)開始使用白光LED作為車頭燈。
壽命比較：髙強度白光LED = 單色LED ＞鹵鎢燈
白光LED的壽命長達10000小時以上，一般可以使用5-10年左右，基本上超過了一般科研儀器的正常工作壽命，基本終身無需換光源，而鹵鎢燈光源基本每2年就要換一次，費時費力，南方是不足一年就要換一次。另：鹵鎢燈每次運行需要半小時預熱，其中累計散發(fā)的熱量對熒光具有明顯的淬滅作用。
上述，便是熒光定量pcr儀的選購要領，供大家借鑒參考，希望對大家有所幫助。
